影响毒性蛋白表达的因素主要包括以下方面: 1. 蛋白本身的特性:如分子量大小、来源物种、是否有毒性、翻译后修饰程度、自身结构的复杂程度等。 2. 宿主的选择:宿主本身的特性以及蛋白表达需求都会对毒性蛋白表达产生影响。 3. 蛋白需求量:根据蛋白应用范围对应的需求量来确定表达系统。 4. 质粒载体的选择:要根据表达系统选择合适的载体,以促进蛋白更好地表达。 5. 融合标签的选择:在蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达,一方面可使蛋白纯化更易进行,另一方面能促进某些不溶性蛋白可溶。 6. 蛋白表达系统的优化:重组蛋白的表达实际过程中可能产生各种问题,因此表达系统的优化很重要。 目前常用的毒性蛋白原核表达解决方案主要有两种思路: 一是提高宿主对毒性蛋白的耐受,例如利用毒性蛋白筛选出的 BL21(DE3)突变菌株 C41(DE3)和双重突变株 C43(DE3),但使用这两种菌株表达蛋白的量比 BL21(DE3)菌株低。 二是严谨控制毒性蛋白的表达,待宿主细菌生长到一定密度后再诱导表达该蛋白从而获取具有毒性的目的蛋白。 等待电视剧的同时,也可以点击下方链接来阅读《狐妖小红娘》原著提前了解剧情了!
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